¿Qué técnica de separación se utiliza para cada compuesto?

Los métodos más utilizados para separar o preparar la muestra antes de la inyección en el detector son:

1. Cromatografía de gases (CG): en este proceso se utiliza para constituyentes gaseosos y vaporizados, como solventes, productos de descomposición de plásticos, pesticidas, hidrocarburos, alcoholes, etc. Este procedimiento consiste en inyectar las muestras en la columna cromatográfica llena de fases estacionarias selectivas y se separan según sus diferencias de distribución entre la fase gaseosa y la fase estacionaria. Los compuestos separados se detectan a la salida de la columna y se pueden identificar y cuantificar utilizando diferentes tipos de detectores (detectores de conductividad térmica, detectores de ionización de llama, detectores de espectrometría de masas). La CG es una técnica fiable y precisa, y se usa a menudo para análisis ambientales, industriales y médicos.
2. Cromatografía de líquidos (o HPLC): en este proceso se utiliza para constituyentes líquidos, como medicamentos, productos alimenticios o productos químicos. En la HPLC, los líquidos se inyectan en la columna cromatográfica llena de fases estacionarias selectivas y se separan según sus afinidades químicas con la fase estacionaria. Los compuestos separados se detectan a la salida de la columna y pueden identificarse y cuantificarse utilizando diferentes tipos de detectores (detectores UV, detectores de fluorescencia, detectores de conductividad). La HPLC es una técnica de separación versátil y sensible, ya que permite la separación de muchos tipos de compuestos líquidos con alta resolución y gran precisión.
3. Cromatografía en capa fina (CCF): en este proceso se utiliza para constituyentes sólidos y mezclas, como productos vegetales, productos farmacéuticos, alimentos, etc. En la CCF, los compuestos se depositan sobre una superficie de sílice o resinas cargadas, que actúan como fase estacionaria. La fase móvil, a menudo un solvente o una mezcla de solventes, se desplaza a través de la fase estacionaria por acción capilar. Esto permite la separación de compuestos en función de su carga neta y sus interacciones químicas con la fase estacionaria. Los compuestos separados se pueden visualizar utilizando diferentes tipos de reveladores, como azul patentado, luz ultravioleta, reactivos de tinción, etc. La cromatografía en capa fina es una técnica sencilla, rápida y económica para la separación e identificación de compuestos sólidos y mezclas.
4. Cromatografía de intercambio iónico (IC): en este proceso se utiliza para iones disueltos en soluciones, como sales, ácidos, álcalis. En la IC, los iones se separan en función de su afinidad química con la fase estacionaria (a menudo una resina cargada) y su diferencia de carga neta. La fase móvil, que suele ser una solución tampón en un medio básico, permite la elución de los iones separados de la columna cromatográfica. Los compuestos separados se detectan a la salida de la columna mediante diferentes tipos de detectores, como detectores de conductividad, detectores UV, etc. La cromatografía de intercambio iónico es una técnica de separación altamente selectiva y sensible para iones disueltos en soluciones.
5. Cromatografía de exclusión por tamaño (SEC): en este proceso se utiliza en biología y química para separar moléculas grandes, como proteínas, polímeros, enzimas, péptidos, ácidos nucleicos y otras macromoléculas. También se utiliza para determinar la distribución del peso molecular de un polímero. En la SEC, se llena una columna cromatográfica con resinas cargadas, normalmente perlas de gel de polímero poroso o celulosa con poros de diferentes tamaños. Las moléculas grandes no pueden penetrar en los poros y, por lo tanto, la columna cromatográfica retrasa su avance, mientras que las moléculas pequeñas penetran en los poros y eluyen más rápidamente. Las moléculas se separan así según su tamaño.  Las ventajas de la SEC incluyen una alta resolución, alta sensibilidad, amplio rango de peso molecular y necesidad de una pequeña cantidad de muestra.

Es importante señalar que cada técnica de separación tiene sus propias ventajas y desventajas en términos de resolución, sensibilidad, velocidad, coste, etc.