Cultivo celular: ¿cómo elegir el gas adecuado?
El cultivo celular requiere el uso de gas para controlar la atmósfera en la que crecen las células. La elección del gas y su calidad dependen, entre otros factores, del tipo de células, de los objetivos del estudio, de la reglamentación y normativa (farmacopea, APPCC) asociadas a su campo de actividad.
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El cultivo celular permite hacer crecer células fuera de su entorno original como parte de la investigación en laboratorio, de ensayos clínicos de medicamentos o tratamientos. Los gases utilizados varían en función del tipo de cultivo (aeróbico, anaeróbico) y del equipo asociado, como incubadoras, biorreactores y microscopios.
La elección de la calidad del gas también depende del tipo de células y de su sensibilidad a la contaminación. La reglamentación también es un factor importante, en función del uso y el contexto de los cultivos. Las buenas prácticas, las reglas y la trazabilidad exigidas serán diferentes en el marco de los experimentos de I+D o de la producción farmacéutica.
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Elegir el tipo de gas adecuado para su cultivo celular
El cultivo celular se realiza en condiciones operativas precisas de temperatura estable y homogénea, pH controlado, concentración de dióxido de carbono (CO2) controlada y humedad relativa elevada, alrededor del 95 %. Pueden utilizarse diversas moléculas como dióxido de carbono (CO2), oxígeno (O2), nitrógeno (N2) y mezclas (CO2/N2, CO2/O2, CO2/Aire).
El CO2 se utiliza para regular el pH con el fin de reconstituir las condiciones in vivo de las células, por ejemplo. Se inyecta oxígeno en los biorreactores en el caso de los cultivos aeróbicos y nitrógeno para recrear las condiciones de los cultivos anaeróbicos o eliminar el exceso de CO2. Las sondas de medida de los niveles de oxígeno pueden calibrarse con una mezcla de oxígeno y nitrógeno.
Calidad del gas: las diferentes gamas disponibles
Dependiendo de su actividad, la elección de la calidad del gas será diferente y dependerá de aspectos regulatorios y técnicos. En particular, a diferencia de los ensayos clínicos de un medicamento o de un gas que va a estar en contacto con alimentos, los ensayos de investigación y desarrollo en laboratorio exigen requisitos de trazabilidad menos estrictos. Para satisfacer sus especificaciones y requisitos específicos, su proveedor de gases puede ofrecerle gases industriales o de alta pureza que cumplan estos requisitos de calidad de conformidad con las normas APPCC o farmacopeas.
Calidad del gas: guía de selección
Los requisitos de calidad y trazabilidad del gas están vinculados principalmente a su actividad y a las células con las que el gas entra en contacto. La elaboración de especificaciones precisas permite verificar el nivel de calidad requerido.
En el marco de los ensayos de investigación y desarrollo, las Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL) permiten garantizar que el laboratorio aplica un conjunto de buenas prácticas al realizar los ensayos, con el fin de garantizar la calidad, la reproducibilidad y la integridad de los resultados. En este contexto, la pureza del gas es un criterio importante para la reproducibilidad y la calidad de los resultados.
La industria alimentaria está obligada a garantizar la seguridad de los consumidores y cumplir las Buenas Prácticas de Fabricación (BPF) y las normas de Análisis de Peligros y Puntos de Control Crítico (APPCC). Cualquier producto en contacto con alimentos debe cumplir unos criterios específicos. Así pues, la calidad del gas utilizado debe garantizar el cumplimiento de la norma APPCC.
La industria farmacéutica exige el cumplimiento de las Buenas Prácticas de Fabricación (BPF) y la aplicación de las normas de la farmacopea. Cualquier producto en contacto con el medicamento a lo largo del proceso de fabricación debe cumplir los requisitos de calidad, seguridad y conformidad. El gas en contacto con el medio de cultivo y su utilización están, por tanto, cubiertos por este marco regulatorio.
Antes de la puesta en servicio de la instalación y posteriormente con regularidad, es necesario comprobar que funciona correctamente y verificar que no haya fugas para evitar cualquier escape de gas en el laboratorio y cualquier contaminación de las muestras.
La formación de los operarios en materia de manipulación y uso de los gases también es esencial para garantizar la seguridad y la calidad de los ensayos o de la producción de cultivos celulares.
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La aplicación del gas con plena seguridad
El tipo de gas utilizado y su calidad requieren una instalación adecuada para garantizar la seguridad de los operarios, la pureza, el caudal y la presión del gas en el medio de cultivo y el cumplimiento de las normas aplicables a su actividad.
Dependiendo de su perfil de consumo, se pueden implementar diferentes soluciones como el uso de bloques o botellas de gas comprimido, instalación de un generador de nitrógeno in situ o suministro de gas licuado.
La elección del equipo de aplicación del gas y su conexión (tipo de válvulas, materiales, reguladores, posición de las válvulas, tuberías, etc.) es tan importante como su calidad y pureza, para no generar impurezas o contaminación del gas en el punto de uso, lo que podría repercutir negativamente en el resultado obtenido.
Por último, la manipulación de las botellas de gas y su almacenamiento también deben seguir unas normas que garanticen la seguridad de las personas y los bienes. Los envases almacenados en el interior del laboratorio o en el exterior en salas de gases específicas requieren de un análisis de riesgos preliminar basado, entre otras cosas, en la toxicidad del gas o el volumen de gas conectado a la instalación (formato de botella pequeña con un volumen limitado o suministro licuado) y la aplicación de medidas para reducir los riesgos identificados, como la colocación de advertencias de seguridad, la instalación de un dispositivo de detección de gas o un sistema de extracción específico.
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